Il cannabidiolo mostra una potente attività antitumorale contro il colangiocarcinoma resistente alla gemcitabina attraverso l'induzione dello stress ER in vitro e in vivo

 

Astratto

Sfondo: Il fallimento del trattamento con gemcitabina nella maggior parte dei pazienti con colangiocarcinoma (CCA) è dovuto alla resistenza ai farmaci. Il potenziale terapeutico dei composti secondari vegetali naturali con tossicità minima, come il cannabidiolo (CBD), è una promettente linea di indagine nel CCA resistente alla gemcitabina. Il nostro obiettivo è studiare gli effetti del CBD sul CCA resistente alla gemcitabina (KKU-213BGemma R) in vitro e in vivo.

Materiali: In vitro, la proliferazione cellulare, la formazione di colonie, l'apoptosi e l'arresto del ciclo cellulare sono stati valutati utilizzando il saggio MTT, il saggio di clonogenicità e la citometria a flusso. L'effetto del CBD sulla produzione di ROS è stato valutato utilizzando la sonda fluorescente DCFH-DA. Il meccanismo esercitato dal CBD sull'apoptosi associata allo stress ER è stato studiato mediante analisi western blot. È stato utilizzato anche un modello di xenotrapianto di CCA resistente alla gemcitabina e l'espressione di PCNA e CHOP è stata valutata mediante analisi immunoistochimica.

Risultati: L'IC50 valori di CBD per KKU-213BGemma R le celle variavano da 19,66 a 21,05 μM. Per una linea cellulare di fibroblasti immortalizzati non cancerosi, i valori rilevanti erano compresi tra 18,29 e 19,21 μM. Il CBD ha soppresso la formazione di colonie da parte di KKU-213BGemma R cellule in modo dose-dipendente nell'intervallo da 10 a 30 μM. Il CBD a 30 μM ha aumentato significativamente l'apoptosi nelle fasi iniziali (16,37%) (P = 0,0024) e tardive (1,8%) (P < 0,0001), per un totale del 18,17% di apoptosi (P = 0,0017), in parte aumentando la produzione di ROS (P < 0,0001). L'arresto del ciclo cellulare multifase è aumentato significativamente a G0/G1 con CBD 10 e 20 μM (P = 0,004 e P = 0,017) e a G2/M con CBD 30 μM (P = 0,005). Il trattamento con CBD ha portato ad un aumento dell'espressione delle proteine dell'apoptosi associate allo stress ER, tra cui p-PERK, BiP, ATF4, CHOP, BAX e citocromo c. Nel topo xenotrapiantato, il CBD ha soppresso significativamente i tumori a 10 e 40 mg/kg· Bw (P = 0,0007 e P = 0,0278, rispettivamente), che è stato supportato da un aumento del CHOP, ma da una diminuzione dell'espressione di PCNA nei tessuti tumorali (P < 0,0001).

Conclusione: I risultati suggeriscono che il CBD mostra una potente attività antitumorale contro il CCA resistente alla gemcitabina in vitro e in vivo, in parte attraverso meccanismi mediati dallo stress ER. Questi risultati indicano che l'uso clinico esplorativo del CBD su pazienti con CCA resistente alla gemcitabina è giustificato.

Parole chiavi: Cancro del dotto biliare; CBD; Cannabis; Morte cellulare; Chemioresistenza; Specie reattive dell'ossigeno.